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做多重熒光總翻車怎么辦?TSA 信號放大 10-1000 倍!mIHC 五標六色實測穩(wěn)

2025-09-08 18:31:17

來源/作者:普拉特澤-生物醫(yī)學整體課題外包平臺

    病理檢測中,你是否常面臨這些難題?—— 想同時標記多個靶點卻受限于抗體種屬,熒光信號弱導致結果模糊,或熒光穩(wěn)定性差影響實驗重復性?如今,依托多重熒光免疫組化(mIHC)技術與TSA 酪胺信號放大技術,這些難點已可輕松解決!

噗啦噗啦實驗室組織染色檢測平臺可承接各種染色檢測外包服務,包括檢測HE染色、油紅O染色、免疫熒光等實驗外包服務,

作為專注于免疫檢測技術研發(fā)與服務的團隊,我們可提供熒光四標五色、五標六色等多重熒光檢測服務

一、 為什么你的多重熒光總是在“翻車”?

多重熒光的復雜性決定了其高失敗率,主要痛點集中在:

  1. 信號太弱:尤其是表達量低的靶點,勉強能看,但根本拍不出高質量的圖片用于發(fā)表。

  2. 背景太高:內源性熒光、非特異性結合、抗體濃度不當,導致信噪比慘不忍睹。

  3. 通道串色:抗體交叉反應、熒光染料光譜重疊嚴重,結果根本沒法看,更別提分析了。

  4. 一抗種屬限制:想同時做多個指標,卻發(fā)現(xiàn)一抗都來自同一種屬,傳統(tǒng)方法直接束手無策。

這些問題的核心在于傳統(tǒng)熒光技術的信號強度和創(chuàng)新色能力已觸及天花板。你需要一種更強的技術來突破極

二、 破局利器:TSA技術如何實現(xiàn)信號放大10-1000倍?

TSA技術(Tyramide Signal Amplification),又稱酪胺放大技術,是多重熒光領域的“游戲規(guī)則改變者”。它的原理堪稱巧妙:

1. HRP催化:一抗與靶標結合后,帶有的HRP(辣根過氧化物酶)二抗會緊隨其上。

2. 引爆反應:當你加入帶有熒光基團的酪胺底物時,HRP會立即催化附近的酪胺分子。

3. 原位沉積:被激活的酪胺分子在HRP所在的靶點位置瞬間形成大量、高密度的熒光沉淀物,直接將信號放大數十倍乃至上千倍!

這意味著:

? 再微弱的信號也能被清晰捕獲,輕松實現(xiàn)低表達靶點的檢測。

? 極高的信噪比:信號強而特異,背景問題迎刃而解。

? 突破色數限制:由于信號極強,可以使用濃度極低的一抗,并通過循環(huán)剝離/再標記流程,輕松實現(xiàn)5標、6色甚至更多,完美解決同種屬一抗難題。


三、 實測見證:五標六色mIHC,結果穩(wěn)到不可思議!

理論說再多,不如實測有說服力。在我們長期的技術積累和反復驗證中,使用基于TSA技術的試劑盒對珍貴臨床樣本進行五標六色mIHC實驗:

? 結果:所有通道信號明亮清晰,對比度極高,細胞定位精準。

? 串色控制:通過嚴謹的抗體搭配和流程控制,各通道間無任何可見串擾。

? 穩(wěn)定性:連續(xù)多次重復實驗,結果高度一致,批次穩(wěn)定性遠超傳統(tǒng)方法。

? 應用場景:完美適用于腫瘤免疫(如CD3/CD4/CD8/FoxP3/PD-L1等多靶點共定位分析)、神經細分研究等復雜課題。

這不僅僅是技術的升級,更是效率和成功率的革命性提升。

四、 如何獲取這份“避坑”指南?

看到這里,你是否已經躍躍欲試?噗啦噗啦實驗室深知從零開始建立一套穩(wěn)定的mIHC-TSA protocol有多么困難。為了幫助大家少走彎路、節(jié)省經費、更快出成果,我們基于大量重復性實驗驗證與長期技術積累,總結了一套極其詳盡的《mIHC-TSA多重熒光實驗權威Protocol及避坑指南》。

資料包含:

? ** step-by-step 標準操作流程(Protocol)**

? 關鍵步驟注意事項與疑難解答

? 抗體選擇與優(yōu)化技巧

? 熒光染料搭配方案

? 結果分析要點

全部資料,免費分享!我們愿意用我們的經驗,為你的科研之路保駕護航:18570028002(微信同號)




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