
分子亞克隆
在分子克隆中,從大片段的克隆中選取特定小片段再克隆。就是初步克隆的外源片段往往較長,含有許多目的基因片段以外的DNA片段,將目的基因所對應(yīng)的一小段DNA找出來。對已經(jīng)獲得的目的DNA片段進行重新克隆,其目的在于對目的DNA進行進一步分析,或者進行重組改造等。
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2026-01-01 13:33:42
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2026-01-01 11:35:02
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河北省滄州市肅寧縣
2025-12-26 22:39:32
實驗介紹
【技術(shù)原理】
在分子克隆中,從大片段的克隆中選取特定小片段再克隆。就是初步克隆的外源片段往往較長,含有許多目的基因片段以外的DNA片段,將目的基因所對應(yīng)的一小段DNA找出來。對已經(jīng)獲得的目的DNA片段進行重新克隆,其目的在于對目的DNA進行進一步分析,或者進行重組改造等。
【實驗流程】

案例展示

送檢與交付標準
| 樣品類型 | 樣品需求 | 保存條件 | 運輸條件 | 備注 |
|---|---|---|---|---|
| 動物組織 | 單個樣品>0.1g,2mlEP管或凍存管裝,不要過量;樣本應(yīng)盡量新鮮,如不能立即提取蛋白或核酸,應(yīng)液氮速凍后凍存于-80℃或更低,凍存樣本避免反復(fù)凍融以致降解 | -80℃ | 干冰 | 所有樣本均須有唯一標記,且標記清晰可識 |
| 種子樣本 | 去殼新鮮或保存于液氮中的的種子樣本,單個樣品>0.2g。 | -80℃ | 干冰 | |
| 貼壁/懸浮細胞 | 1. 總RNA或蛋白:106cell/指標、漿/核RNA或蛋白:107cell/指標、線粒體RNA或蛋白:2*107 cell/指標,樣本盡量新鮮,細胞收取后直接加Trizol(QPCR檢測)或直接凍存于-80℃ 2. 若細胞處理(加藥、轉(zhuǎn)染、感染)后狀態(tài)差應(yīng)酌情加大收樣量 | -80℃ | 干冰 | |
| 全血/血清樣品 | 用抗凝管保存的外周血 5~10ml,骨髓 1~3ml; -80℃保存不超半周的白細胞勻漿>400μl,每 400μl 加入 400μl Trizol。 | -80℃ | 干冰 | |
| 石蠟包埋樣品 | 由標準的石蠟包埋盒包埋的石蠟塊,有效厚度大于 0.1cm; 新鮮的 FFPE 組織切片,每片厚度不超過 10μm,2~8 張,表面積不超過 250mm2。 | -20℃ | 冰袋 | |
| 抗體 | 1. 按樣本種屬提供滿足相應(yīng)實驗要求的抗體; 2. 按抗體說明書要求寄送,盡量避免分裝;如分裝,確保量足夠進行實驗,并提供抗體說明書。 3.保存抗體的抗體管上應(yīng)有能夠識別此抗體的標記,抗體的量應(yīng)大于實驗所需的量。 | -20℃ | 冰袋 | |
| 引物 | 干粉,≥1OD,如進行預(yù)實驗,每個基因至少提供兩對引物, 附帶公司引物合成單。 | -20℃ | 冰袋或常溫 |
