原位雜交
原位雜交（in situ hybridization）是應(yīng)用已知堿基順序并帶有標(biāo)記的核酸探針與組織、細(xì)胞等樣本中待測目的基因按堿基配對原則進(jìn)行特異性結(jié)合而形成的雜交體，然后再用與標(biāo)記物相應(yīng)的檢測方法。
相關(guān)實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)承諾函
咨詢記錄
技術(shù)文章
城市
時間
浙江省寧波市余姚市
2026-01-01 12:52:40
江蘇省鎮(zhèn)江市
2026-01-01 01:59:43
浙江省杭州市
2026-01-01 00:30:29
浙江省臺州市
2025-12-31 19:54:23
江蘇省南通市
2025-12-31 18:01:07
江蘇省南通市
2025-12-31 18:01:06
江蘇省鎮(zhèn)江市
2025-12-31 17:29:25
江蘇省南通市
2025-12-31 16:58:04
江蘇省蘇州市
2025-12-31 16:41:36
北京市
2025-12-31 09:53:23
甲苯胺藍(lán)染色實(shí)驗(yàn)問題和解決方法
2025-02-18 13:12:17
甲苯胺藍(lán)染色在醫(yī)學(xué)研究中的獨(dú)特價值與應(yīng)用
2025-02-17 15:55:02
甲苯胺藍(lán)染色試劑盒推薦
2025-02-14 17:34:00
甲苯胺藍(lán)染色新視角
2025-02-14 14:53:48
優(yōu)化甲苯胺藍(lán)染色流程【技術(shù)推薦】
2025-02-13 16:37:14
甲苯胺藍(lán)染色染液配制方法
2025-02-13 13:30:10
甲苯胺藍(lán)染色步驟
2025-02-12 17:32:25
甲苯胺藍(lán)染色原理
2025-02-11 14:52:14
TTC染色注意事項(xiàng)
2025-02-08 16:15:23
TTC染色實(shí)驗(yàn)：揭秘細(xì)胞活性的可視化過程
2025-02-08 14:50:36
TTC染色常見問題解答
2025-02-07 15:37:49
TTC染色在醫(yī)學(xué)研究中的意義
2025-02-06 14:25:34
TTC染色詳細(xì)計(jì)算分析過程
2025-02-05 14:00:44
TTC染色檢測種子生存能力方法
2025-01-24 16:32:08
TTC染色劑配制
2025-01-24 11:39:42
TTC染色步驟+數(shù)據(jù)分析
2025-01-23 13:51:28
TTC染色原理
2025-01-23 11:35:29
TSA多色免疫熒光最新研究進(jìn)展
2025-01-15 16:57:37
TSA多色免疫熒光實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)
2025-01-15 13:24:28
TSA多色免疫熒光實(shí)驗(yàn)過程中的問題以及解決方法
2025-01-14 16:47:49
TSA多色免疫熒光在科研中的應(yīng)用《科研探索中的新利器》
2025-01-10 17:49:14
TSA多色免疫熒光染色方法，輕松掌握多色染色技巧
2025-01-10 16:08:14
TSA多色免疫熒光與單色免疫熒光的區(qū)別
2025-01-10 13:47:42
TSA多色免疫熒光試劑推薦
2025-01-09 14:04:28
TSA多色免疫熒光結(jié)果解讀
2025-01-07 14:29:01
TSA多色免疫熒光技術(shù)教程
2025-01-06 17:02:10
TSA多色免疫熒光原理介紹
2025-01-06 14:01:09
考馬斯亮藍(lán)染色注意事項(xiàng)
2024-12-31 17:01:39
考馬斯亮藍(lán)染色液配方 輕松掌握實(shí)驗(yàn)技巧
2024-12-31 13:59:49
考馬斯亮藍(lán)染色液配方 輕松掌握實(shí)驗(yàn)技巧
2024-12-31 13:59:49
考馬斯亮藍(lán)染色常見問題解析
2024-12-30 16:58:42
如何正確進(jìn)行考馬斯亮藍(lán)染色？看這里就夠了
2024-12-30 14:47:25
考馬斯亮藍(lán)染色后，如何保存凝膠？
2024-12-30 11:46:25
考馬斯亮藍(lán)染色原理與傳統(tǒng)染色
2024-12-26 15:44:07
考馬斯亮藍(lán)測蛋白濃度步驟
2024-12-26 14:12:43
考馬斯亮藍(lán)染色步驟全解析
2024-12-25 17:04:32
考馬斯亮藍(lán)染色原理
2024-12-25 15:55:00
免疫熒光染色常見問題以及解決方法
2024-07-17 15:28:48
免疫熒光染色實(shí)驗(yàn)儀器
2024-07-16 11:45:51
免疫熒光染色與流式細(xì)胞儀的比較
2024-07-15 11:51:40
免疫熒光染色與免疫組化的比較
2024-07-12 15:31:29
免疫熒光染色封片技巧
2024-07-10 16:46:43
免疫熒光染色實(shí)驗(yàn)所需材料【輕松掌握實(shí)驗(yàn)精髓】
2024-07-10 11:30:18
免疫熒光染色實(shí)驗(yàn)方法【深入解析與操作指南】
2024-07-09 18:00:27
免疫熒光染色步驟
2024-07-08 16:05:38
免疫熒光染色技術(shù)原理【小白到大神】
2024-07-08 14:40:21
透射電鏡在生物技術(shù)中的應(yīng)用
2024-07-03 17:27:44
如何選擇透射電鏡實(shí)驗(yàn)設(shè)備？專業(yè)指南
2024-07-03 11:42:54
透射電鏡與掃描電鏡的區(qū)別
2024-07-01 11:50:07
透射電鏡觀察什么？
2024-06-27 10:59:36
透射電鏡的結(jié)構(gòu)與成像原理探究
2024-06-26 17:04:16
lncRNA實(shí)驗(yàn)教程
2024-06-21 16:45:47
冰凍切片實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)
2024-06-18 16:01:24
冰凍切片實(shí)驗(yàn)技巧分享
2024-06-13 16:00:48
冰凍切片實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
2024-06-12 17:47:20
冰凍切片實(shí)驗(yàn)步驟
2024-06-12 11:05:47
冰凍切片實(shí)驗(yàn)原理以及應(yīng)用
2024-06-11 15:52:55
CCK8檢測實(shí)驗(yàn)報(bào)告（一）
2024-05-31 11:06:50
PAS糖原染色常見問題及解決方案
2024-05-29 10:29:11
PAS染色臨床應(yīng)用
2024-05-27 15:28:28
PAS染色實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)
2024-05-27 14:03:53
PAS染色實(shí)驗(yàn)材料有哪些？【組織染色實(shí)驗(yàn)外包】
2024-05-24 11:43:54
PAS染色結(jié)果解讀
2024-05-23 17:12:34
PAS染色的實(shí)驗(yàn)步驟全攻略：從入門到精通
2024-05-22 18:02:19
如何獲得更清晰的染色效果？【PAS染色技巧分享】
2024-05-22 11:03:29
PAS染色實(shí)驗(yàn)報(bào)告【小鼠心肌】
2024-05-21 18:00:23
PAS檢測實(shí)驗(yàn)報(bào)告【小鼠腎】
2024-05-21 17:27:03
PAS染色實(shí)驗(yàn)原理介紹
2024-05-21 16:37:55
MASSON（馬松）染色實(shí)驗(yàn)過程中常見問題和解決方法
2024-05-17 16:51:18
MASSON（馬松）染色實(shí)驗(yàn)技術(shù)注意事項(xiàng)【新手必看】
2024-05-17 15:50:51
MASSON（馬松）染色實(shí)驗(yàn)中染液的順序
2024-05-16 17:27:02
MASSON（馬松）染色實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹窘M織染色外包】
2024-05-15 17:26:27
MASSON（馬松）染色原理陽性意義
2024-05-15 16:40:13
MASSON（馬松）染色結(jié)果怎么看纖維化？
2024-05-14 15:30:42
MASSON（馬松）染色方法及其在實(shí)驗(yàn)室的應(yīng)用
2024-05-13 16:01:00
Masson染色實(shí)驗(yàn)報(bào)告分析
2024-05-13 11:52:02
如何進(jìn)行MASSON染色？專業(yè)教程與技巧分享
2024-05-11 15:52:01
深入了解MASSON染色：原理、步驟與實(shí)例
2024-05-11 14:38:33
TUNEL染色實(shí)驗(yàn)過程中的常見問題與解決方法分析
2024-05-09 15:09:25
TUNEL染色實(shí)驗(yàn)中的質(zhì)量控制措施
2024-05-08 17:47:16
TUNEL染色實(shí)驗(yàn)與熒光顯微鏡
2024-05-07 17:03:53
TUNEL染色實(shí)驗(yàn)與細(xì)胞凋亡機(jī)制
2024-05-07 14:37:14
TUNEL染色實(shí)驗(yàn)在凋亡檢測中的優(yōu)勢與局限性
2024-04-29 17:52:55
Tunnel染色實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)【新手必看指南】
2024-04-26 14:08:38
TUNEL染色實(shí)驗(yàn)試劑選擇和配置方法
2024-04-24 14:32:10
如何進(jìn)行TUNEL染色陽性對照實(shí)驗(yàn)？
2024-04-23 15:04:07
TUNEL檢測實(shí)驗(yàn)報(bào)告（三）
2024-04-23 11:23:41
TUNEL檢測實(shí)驗(yàn)報(bào)告（二）
2024-04-22 15:05:35
TUNEL檢測實(shí)驗(yàn)報(bào)告（一）
2024-04-22 13:44:20
TUNEL染色實(shí)驗(yàn)原理和實(shí)驗(yàn)操作技巧【詳細(xì)篇】
2024-04-22 11:25:02
TUNEL染色原理介紹【組織染色】
2024-04-19 17:10:01
病理組織染色實(shí)驗(yàn)大全（二）
2024-04-08 16:24:35
激光共聚焦和熒光共聚焦的區(qū)別
2024-03-25 17:33:25
激光共聚焦實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
2024-03-25 16:10:39
激光共聚焦結(jié)果分析
2024-03-21 16:02:38
激光共聚焦實(shí)驗(yàn)步驟詳解
2024-03-21 13:03:58
原位雜交方法【總結(jié)】
2024-03-19 14:11:07
原位雜交實(shí)驗(yàn)操作細(xì)節(jié)有哪些？
2024-03-15 16:47:17
原位雜交實(shí)驗(yàn)的應(yīng)用
2024-03-15 15:04:52
原位雜交實(shí)驗(yàn)分析——原位雜交實(shí)驗(yàn)外包
2024-03-15 11:48:36
實(shí)驗(yàn)介紹
【技術(shù)原理】
原位雜交（in situ hybridization）是應(yīng)用已知堿基順序并帶有標(biāo)記的核酸探針與組織、細(xì)胞等樣本中待測目的基因按堿基配對原則進(jìn)行特異性結(jié)合而形成的雜交體，然后再用與標(biāo)記物相應(yīng)的檢測方法，在被檢測的核酸原位形成帶顏色的雜交信號，從而在顯微鏡下進(jìn)行目的基因的定位檢測觀察。主要檢測方法分為DAB顯色和熒光顯色兩種。
【實(shí)驗(yàn)流程】
案例展示
組織的miRNA原位雜交
技術(shù)總結(jié)
【常見問題】
1、RNA探針長度以50-150bp為佳，探針已進(jìn)入細(xì)胞，雜交率高，雜交時間短。
2、原位雜交反應(yīng)中探針濃度應(yīng)超過靶序列的濃度，探針濃度必須給予該實(shí)驗(yàn)最大信噪比，因?yàn)楸尘爸雀叩团c探針濃度有關(guān)。
3、雜交溫度應(yīng)低于解鏈或溶解溫度20-30℃。雜交反應(yīng)的時間可隨探針濃度的增加而縮短，雜交時間過短會造成雜交不完全，雜交時間過長會增加非特異性著色。
4、組織固定或蔗糖脫水不好會使組織有較多的空泡。
【注意事項(xiàng)】
1、固定液的選擇及固定時間
石蠟組織建議用10%中性緩沖福爾馬林（含1/1000 DEPC）固定1～24h，其它固定液對實(shí)驗(yàn)結(jié)果可能產(chǎn)生一定的影響。
2、組織切片和載玻片的選擇
組織切片4～5μm 厚，過厚或過薄的切片均會對信號的強(qiáng)弱產(chǎn)生影響，而且切片應(yīng)完整，質(zhì)量良好，否則會在預(yù)處理時掉片。載玻片的選擇建議使用防脫載玻片，有條件的可使用更好的陽離子或者陰離子專用載玻片，可有效防止脫片現(xiàn)象的發(fā)生。
3、實(shí)驗(yàn)過程中切片的預(yù)處理
切片預(yù)處理過程包括煮沸處理和蛋白酶消化。當(dāng)組織處理不規(guī)范、切片過厚或烤片不足時，在煮沸過程中容易掉片，建議烤片溫度在56℃過夜。煮沸過程中要嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)溫度和時間。
送檢與交付標(biāo)準(zhǔn)
| 樣品類型 | 樣品需求 | 保存條件 | 運(yùn)輸條件 | 備注 |
|---|---|---|---|---|
| 新鮮組織 | 新鮮取材組織，用 PBS 清洗干凈血液等，立即-80℃保存 | -80℃ | 干冰 | 所有樣本均須有唯一標(biāo)記，且標(biāo)記清晰可識 |
| 一般固定組織 | 一般組織體積不超過2cmX2cmX0.5cm，固定時盡量保持組織的原有形態(tài)并清理干凈血液及多余部分，如腸道內(nèi)容物；固定液體積為組織大小的10倍以上，容器足夠容納組織不使其擠壓變形。標(biāo)注好固定液類型和固定時長 | 常溫 | 常溫 | |
| 特殊固定組織 | 睪丸、眼球、脊髓、肌肉等組織：推薦使用對應(yīng)的特殊固定液進(jìn)行固定，以保證固定效果。如Bouin液，適用于睪丸組織、皮膚組織及眼球的固定 | |||
| 組織蠟塊 | 組織由標(biāo)準(zhǔn)的石蠟包埋盒包埋（尺寸為30*24*7mm），石蠟與組織要均勻接合，不能有裂痕；蠟塊厚度根據(jù)所需切片的數(shù)量而定，有效厚度至少要超過 0.1cm。盡量提供半年內(nèi)的組織蠟塊，超過半年的蠟塊抗原可能丟失，做免疫組化可能出現(xiàn)檢測不到蛋白。 | 常溫 | 常溫 | |
| 組織切片 | 需用防脫載玻片進(jìn)行撈片，并注明切片厚度、已烤片溫度與時間，組織應(yīng)在靠近切片下端 1/3 處。 | 4℃ | 冰袋 | |
| 細(xì)胞爬片 | 使用 12 孔板或 24 孔板專用細(xì)胞爬片，細(xì)胞爬片經(jīng)固定后用 PBS 洗滌 2~3 次，保存在 PBS 中，用封口膜密封孔板。每個爬片在孔板蓋上應(yīng)有唯一的標(biāo)記，并有電子版的分組信息，以防標(biāo)記在運(yùn)輸途中模糊。 | 常溫 | 常溫 | |
| 植物樣本 | 新鮮組織FAA固定，木質(zhì)化程度不高；對于較薄的葉片，如果要求平行葉片切片，難以保證切完整；根莖要求直徑>1mm | 常溫 | 常溫 | |
| 抗體 | 保存抗體的抗體管上應(yīng)有能夠識別此抗體的標(biāo)記，并附帶說明書，抗體的量應(yīng)大于實(shí)驗(yàn)所需的量。組織切片、組織芯片按稀釋后 100μl 一張切片計(jì)算抗體用量， 24 孔板細(xì)胞爬片圓形蓋玻片按稀釋后 200μl 一張計(jì)算抗體用量，12 孔板細(xì)胞爬片圓形蓋玻片按稀釋后 400μl 一張計(jì)算抗體用量。 | -20℃ | 冰袋或干冰 |
電話：400-691-6686
在線時間：8:00-24:00
微信關(guān)注公眾號
湘公網(wǎng)安備