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實驗介紹
【技術(shù)原理】
流式利用不同熒光物質(zhì)標記的單克隆抗體，與待測成分作用，然后上流式細胞儀檢測待測細胞。待測細胞隨流動室內(nèi)的流動鞘液排列成單列，一個個迅速通過激光聚焦區(qū)，激光在對每個細胞進行照射時可同時得到前向角散射和側(cè)向角散射2種散射光以及激發(fā)熒光標記物發(fā)出的信號，利用這些信號，可計算出相對含量，從而得到細胞群的相對比值。
根據(jù)活化狀態(tài)、發(fā)揮功能以及分泌因子的不同，巨噬細胞主要可以分為經(jīng)典活化的M1型巨噬細胞和選擇性活化的M2巨噬細胞。
M1型巨噬細胞一般是通過干擾素-γ及細菌脂多糖(LPS)活化，M1主要分泌促炎因子，在炎癥早期承擔著重要作用。
M2型巨噬細胞通過Th2細胞因子如IL-4、IL-13及免疫復合物進行活化，M2表達抑制炎癥因子，起著抑制炎癥反應(yīng)及組織修復的作用。M2巨噬細胞又可以分為三種亞型，分別為M2a、M2b、M2。
我們常用的檢測指標：
巨噬細胞（人）：CD45 、CD14、CD86、 CD206
巨噬細胞（鼠）： CD45 、F4/80 、CD11b 、CD206
【實驗流程】
組織：制成單細胞懸液-溶血-離心去上清-調(diào)整細胞密度-加入相應(yīng)的標記抗體-孵育-離心去上清-上機
血液：溶血-離心去上清-調(diào)整細胞密度-加入相應(yīng)的表面標記抗體-孵育-離心去上清-上機
案例展示
送檢與交付標準
| 樣品類型 | 樣品需求 | 運輸條件 |
|---|---|---|
| 組織 | 離體后組織制成單細胞懸液，加入PBS培養(yǎng)基內(nèi) | 常溫運輸 |
| 活細胞 | 樣本量：1*106個細胞/TEST，加入PBS培養(yǎng)基內(nèi) | 常溫運輸 |
| 血液 | 將血液采集在EDTA肝素鈉的抗凝采血管內(nèi) | 常溫運輸 |
電話：400-691-6686
在線時間：8:00-24:00
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