
細胞誘導(dǎo)/分化
細胞分化的本質(zhì)是基因組在時間和空間上的選擇性表達,通過不同基因表達的開啟或關(guān)閉,最終產(chǎn)生標志性蛋白質(zhì)。細胞誘導(dǎo)是指將一群不同類型或者形態(tài)結(jié)構(gòu)、功能特征存在差異的細胞通過生物學(xué)、物理學(xué)等手段,將之轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂邢嗨?相同形態(tài)結(jié)構(gòu)、功能特征的細胞群體的過程。
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實驗介紹
【應(yīng)用簡介】
一般細胞系,尤其是腫瘤細胞系具有異質(zhì)性,導(dǎo)致通過細胞實驗獲得的數(shù)據(jù)往往不能真實反映要研究的細胞類群的生理特征和生物學(xué)功能。為了使研究的對象盡量保持一致性,通過細胞誘導(dǎo)或者細胞分化的方式能盡可能地將細胞類群調(diào)節(jié)到相對一致的狀態(tài),從而使實驗結(jié)果的可信度更高。
【原理介紹】
細胞分化是指同一來源的細胞逐漸產(chǎn)生出形態(tài)結(jié)構(gòu)、功能特征各不相同的細胞類群的過程,其結(jié)果是在空間上細胞產(chǎn)生差異,在時間上同一細胞與其從前的狀態(tài)有所不同。細胞分化的本質(zhì)是基因組在時間和空間上的選擇性表達,通過不同基因表達的開啟或關(guān)閉,最終產(chǎn)生標志性蛋白質(zhì)。細胞誘導(dǎo)是指將一群不同類型或者形態(tài)結(jié)構(gòu)、功能特征存在差異的細胞通過生物學(xué)、物理學(xué)等手段,將之轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂邢嗨?相同形態(tài)結(jié)構(gòu)、功能特征的細胞群體的過程。
【實驗方法】
根據(jù)細胞類型的不同,誘導(dǎo)/分化的方式和方法各異。
案例展示

骨髓間充質(zhì)干細胞成骨誘導(dǎo)分化
技術(shù)總結(jié)
根據(jù)細胞類型的不同,誘導(dǎo)/分化的方式和方法各異。
送檢與交付標準
| 樣品類型 | 樣品需求 | 保存條件 | 運輸條件 | 備注 |
|---|---|---|---|---|
| 凍存細胞 | 1.取對數(shù)生長期的細胞,消化離心收集細胞,加入凍存液吹打混勻,裝入凍存管,標明細胞名稱/細胞代數(shù),凍存細胞數(shù)量在1-5*106個/ml。 2.項目啟動后細胞復(fù)蘇,復(fù)蘇后3天反饋細胞狀態(tài),3-5天反饋細胞污染情況,5-7天反饋支原體污染情況。 3. 細胞詳細信息(名稱、培養(yǎng)基和其他培養(yǎng)條件等,如經(jīng)過特別處理需告知并提供必要的信息) | 液氮 | 干冰 | 所有樣本均須有唯一標記,且標記清晰可識 |
| 復(fù)蘇后細胞 | 1.使用T25培養(yǎng)瓶運輸。細胞匯合度達到60%以上,裝滿培養(yǎng)液,只留紐扣大小的氣泡,瓶口用封口膜封好,標明細胞名稱/細胞代數(shù)/接種時間/培養(yǎng)基類型,瓶子固定運輸。 2.收到細胞后3天反饋細胞狀態(tài),3-5天反饋細胞污染情況,5-7天反饋支原體污染情況。 3. 細胞詳細信息(名稱、培養(yǎng)基和其他培養(yǎng)條件等,如經(jīng)過特別處理需告知并提供必要的信息) | 常溫 | 常溫 | |
| 質(zhì)粒 | 1.純度高,無內(nèi)毒素,無蛋白質(zhì),基因組DNA/RNA污染,質(zhì)粒A260:A280的比值在1.8-2.0之間 2.濃度不低于0.5μg/μl,總量大于100μg,無內(nèi)毒素處理 3. 載體詳細信息,包括名稱、大小、抗性、熒光標記 | -20℃ | 冰袋 | |
| 病毒 | 1.慢病毒:滴度不低于1*108TU/ml,體積約200μl,標明制備時間,且沒有反復(fù)凍融 2.腺病毒:滴度不低于1*109PFU/ml,體積約200μl,標明制備時間,且沒有反復(fù)凍融 3.明確是否表達熒光標簽蛋白及其種類,最好需要提供病毒載體圖譜; | -80℃ | 干冰 |
