甲苯胺藍(lán)染色
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實(shí)驗(yàn)介紹
【實(shí)驗(yàn)介紹】
甲苯胺藍(lán)(Toluidine Blue O)是一種常用的人工合成染料，屬于醌亞胺染料類(lèi)。這類(lèi)染料主要含有胺基和醌型苯環(huán)兩個(gè)發(fā)色團(tuán)，從而成色原顯色。甲苯胺藍(lán)中的陽(yáng)離子有染色作用，組織細(xì)胞的酸性物質(zhì)與其中的陽(yáng)離子相結(jié)合而被染色。甲苯胺藍(lán)不僅含有兩個(gè)發(fā)色團(tuán)，還含有兩個(gè)助色團(tuán)，能促使染料產(chǎn)生電離成鹽類(lèi)，幫助發(fā)色團(tuán)對(duì)組織產(chǎn)生染色力，使切片上的組織細(xì)胞著色，可染細(xì)胞核使之呈藍(lán)色。
【實(shí)驗(yàn)步驟】
Step1: 石蠟切片常規(guī)操作脫蠟水化。
Step2: 甲苯胺藍(lán)染色2-10 min。
Step3: 自來(lái)水沖洗2min。
Step4: 脫水：依次經(jīng)85%、95%Ⅰ、95%Ⅱ各10秒，無(wú)水乙醇Ⅰ30s、無(wú)水乙醇Ⅱ1min。
Step5: 透明：經(jīng)二甲苯Ⅰ1min、二甲苯Ⅱ2min。
Step6: 中性樹(shù)膠固封，鏡檢。
優(yōu)秀案例展示
結(jié)果分析：
1. 染色清晰，組織結(jié)構(gòu)層次分明。
2. 木質(zhì)化細(xì)胞壁呈藍(lán)綠色，纖維素細(xì)胞壁呈紫藍(lán)色。
技術(shù)總結(jié)
【常見(jiàn)問(wèn)題】
1.染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短導(dǎo)致的染色過(guò)深或過(guò)淺。
2.植物組織較脆，易出現(xiàn)掉片。
【注意事項(xiàng)】
1.控制染色時(shí)間，保證染色不至于過(guò)深或過(guò)淺，必要時(shí)可在顯微鏡下觀察控制染色時(shí)間。
2.水洗時(shí)間不易過(guò)長(zhǎng)，保證陽(yáng)性顯色清晰可見(jiàn)。
3.植物組織切片時(shí)應(yīng)控制切片厚度以及攤片時(shí)間，減少掉片風(fēng)險(xiǎn)。
送檢與交付標(biāo)準(zhǔn)
【交付標(biāo)準(zhǔn)】
1. 實(shí)驗(yàn)報(bào)告
2. 真實(shí)實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3. 原始圖片
4. 實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù)
5. 剩余物料在周期內(nèi)可返還（超過(guò)周期，不予返還）
【送檢流程】
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